| 英文名 | Practical Cellular Immunology | |
|---|---|---|
| 科目概要 | 医学専攻（博士課程） 生体機能医科学群 ６単位 演習（博士） | |
| 履修期 | 通年 | |
| 科目責任者 | 末永 忠広 | |
| 担当者 | 末永 忠広, 竹内 恵美子, 佐藤 雅, 今西 貴之 | |
| 講義室 | ||
下記のいずれかもしくは複数を習得する。
1) フローサイトメトリーの基礎技術、解析法
2) 遺伝子クローニング技術
3) 遺伝子発現解析技術
1) 細胞の抗体による染色、フローサイトメーターによる取り込み・ソーティング、解析ソフトウエアによるデータ解析を行う。
2) 免疫細胞、病原体に発現する分子をコードする遺伝子を増幅し、発現プラスミドに組込み、その成否を確認する。
3) 免疫細胞、病原体に発現する分子をコードするmRNA発現量をリアルタイム PCRを用いて解析する。
実機を用いて解析を行う。解析結果を図表・グラフとして表し、その結果と解釈をディスカッションすることによって、科学的・論理的思考が可能となるようフィードバックする。
| ◎ | DP1 専門領域の全般的な知識と最新の国際的研究動向の把握 |
| ◎ | DP2 先端の研究手法 |
| 〇 | DP3 医学研究や医療分野のリーダーとして求められる高い見識と倫理観とコミュニケーション能力（授与学位：医学） 医科学研究や医療分野のリーダーとして求められる高い見識と倫理観とコミュニケーション能力（授与学位：医科学） |
| 〇 | DP4 研究チームのリーダーとして医学研究の立案遂行（授与学位：医学） 研究チームのリーダーとして医科学研究の立案遂行（授与学位：医科学） |
| 〇 | DP5 国際的なレベルの学術論文の作成、出版 |
| 項目 | 内容 | 担当者 |
|---|---|---|
| 1) フローサイトメトリーの基礎技術、解析法 | 細胞をマウス臓器あるいは培養容器より回収し、細胞の抗体による染色、フローサイトメーターによる取り込み・ソーティングを行う。解析ソフトウエアによるデータ解析を行い、その妥当性を評価する。 | 末永 忠広 竹内 恵美子 佐藤 雅 今西 貴之 |
| 2) 遺伝子クローニング技術 | 免疫細胞、病原体よりRNAもしくはゲノムDNAを抽出する。逆転写反応でcDNAを得て、目的分子をコードする遺伝子をPCRにて増幅し、発現ベクターに組み込む。クローニングした遺伝子のDNA塩基配列をサンガーシークエンシングにより確認する。さらに、クローニングしたプラスミドを細胞に導入し、タンパク質発現をフローサイトメトリー、ウェスタンブロット等で解析する。 | 末永 忠広 |
| 3) 遺伝子発現解析技術 | 免疫細胞、病原体に発現する分子をコードするmRNAを抽出し、その発現量をリアルタイム PCRを用いて解析する。 | 竹内 恵美子 佐藤 雅 今西 貴之 |
各機材の立ち上げ、動作、シャットダウン等の操作やデータの解析が正しく出来る。生データの加工を適切に行える。得たデータを適切に解釈できる。
演習における解析結果の図表・グラフの作成（50％）、演習への積極的な参加（30％）、演習結果の解釈を口述もしくはレポートで確認し（20％）、評価する。無断欠席は減点となる。
フローサイトメーター 、セルソーター 、フローサイトメトリー解析ソフト 、RNA抽出 、cDNAへの逆転写、ベクターへのSLiCE法・DNAライゲースによる組込み法、シークエンス反応、シークエンサー、ウェスタンブロット法、リアルタイム PCR機のマニュアルや簡略化したプロトコールを必要に応じて確認する。これらの事前読解と理解のために、授業外学習時間として、ひとつにつき1時間程度、合計30時間程度が見込まれる。
本学での組換えDNA実験の講習を受講後実施可能である演習も含まれている。
| 種別 | 書名 |
|---|---|
| 教科書 | 特に指定しない。 |
| 参考書 | 特に指定しない。 |